CHOLESTEROL

LDL CHOLESTEROL liquicolor

Test Homogen lansung untuk pengukuran LDL-Cholesterol

Test Warna – Enzymatik

Ukuran kemasan

REF ³ 10 094 80 ml Kit komplit

IVD ³

Tujuan pemakaian

HUMAN’s LDL Cholesterol liquicolor adalah pemeriksaan enzymatik homogen langsung untuk pengukuran kuantitatif LDL-cholesterol (LDL). LDL dianggap sebagai komponen lemak yang menaikkan resiko terhadap penyakit jantung coroner (CHD). Bersama dengan HDL-cholesterol (dihitung misalnya dengan HUMAN’s HDL Cholesterol liquicolor Kat. No. 10084) sebagai diagnosa penting untuk estimasi resiko individu terhadap CHD.

Metoda

Test mengkombinasi 2 langkah : Dalam langkah pertama chylomicrons, VLDL dan HDL cholesterol dihilangkan secara khusus melalui reaksi enzymatik. Dalam langkah ke dua LDL-cholesterol yang tertinggal diukur melalui reaksi enzymatik khusus, juga memakai surfactants specific untuk LDL. Kombinasi ini membuat pemeriksaan ini lebih spesifik untuk LDL daripada metoda lain.

Prinsip reaksi

Langkah pertama

CHE + CHO

HDL, VLDL dan chylomicrons ------------------> cholestenone + H₂O₂

Kondisi khusus

Katalase

2 H₂O₂ ------------------> 2 H₂O + O₂

Langkah ke dua

CHE + CHO

LDL -------------------> cholestenone + H₂O₂

Surfactant khusus

Peroxidase

2 H₂O₂ + chromogen --------------------> zat warna quinone

Isi, komposisi reagen dalam test

ENZ 1 x 60 ml Enzyme (tutup merah)

Buffer Good’s, pH 7.0 (25^o C) 50 mmol/l

Cholesterol esterase 600 U/l

Cholesterol oxidase 500 U/l

Katalase 400 U/ml

N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3

dimethoxyaniline (TOOS) 2.0 mmol/l

Deterjen 0.3% w/v

SUB 1 x 20 ml Substrat (tutup biru)

Peroxidase 4000 U/l

4-Aminoantipyrin (4-AA) 4 mmol/l

Buffer Good’s, pH 7.0 (25^o C) 50 mmol/l

Natrium azida 0.05%

Deterjen 1% w/v

CAL 1 x 4 ml Calibrator

Cholesterol konsentrasi lihat label vial

Pengawet total`konsentrasi <1>

Persiapan reagen dan stabilitas

ENZ dan SUB siap pakai.

Stabilitas : setelah reagen dibuka stabil sampai 1 bulan bila disimpan pada 2…..8^o C. Hindari kontaminasi. Jangan dibekukan. Tutup jangan tertukar.

CAL Rekonstitusi isi vial dengan 4 ml tepat air suling segar bebas germ, tutup vial dan putar hati-hati untuk melarutkan semua lyophilisat. Hindari buih. Biarkan selama 30 menit sebelum digunakan.

Stabilitas : 10 hari pada 2….8^o C. Bila perlu, Calibrator segar yang dibuat dapat dibagi dalam beberapa bagian dan disimpan beku pada –20^o C selama maximum 30 hari. Membekukan dan mencairkan hanya sekali, campur dengan hati-hati setelah mencairkan.

Spesimen

Serum, plasma

Stabilitas : Dianjurkan untuk memeriksa langsung setelah sampling. Serum dapat disimpan pada 2……8^o C sampai 5 hari.

Dalam plasma, konsentrasi anti-koagulan berikut tidak boleh lebih : EDTA-2Na <>

Pemeriksaan

Panjang gelombang : Hg 578 nm, 593 nm (570 – 610 nm)

Celah optik : 1 cm

Suhu : 37^o C

Pengukuran : terhadap blanko reagen (RB), cukup 1 blanko per seri.

Prosedur (manual)

Hangatkan reagen dan cuvet sampai 37^o C. Suhu harus dijaga konstan (± 0.5^o C) selama test.

Pipet ke dalam cuvet	Blanko reagen (RB)	Calibrator / sampel
Air Calibrator / sampel R1	10 ml --- 750 ml	--- 10 ml 750 ml
Campur dengan hati-hati dan inkubasi selama 5 menit tepat pada 37o C
R2	250 ml	250 ml
Campur dengan hati-hati, inkubasi pada 37o C dan baca absorbans DA calibrator dan sampel terhadap blanko reagen (RB) setelah 5 menit.

Test dapat dijalankan dalam mode kinetik fixed time pada analiser.

Perhitungan

Hitung konsentrasi sampel sebagai berikut :

DA_sampel

C_sampel = C_calibrator x --------------------- (mg/dl)

DA_calibrator

faktor konversi : C (mg/dl ) x 0.02586 = C (mmol/l).

Karakteristik

Linearitas: Sampai LDL-cholesterol 1000 mg/dl (prosedur manual).

Bila digunakan analiser, batas linearitas tergantung pada pemakaian

Jika konsentrasi LDL melebihi range pengukuran, encerkan sampel 1 + 1 dengan saline (0.9%) dan ulangi pemeriksaan. Kalikan hasil dengan 2.

Test tidak terganggu Tryg S/d 1000 mg/dl, HB S/d 500 mg/dl, Bilirubin s/d 30 mg/dl, Vit C s/d 50 mg/dl dan sample keruh sedikit.

Jika Tryg diatas 1000 mg/dl, encerkan sample dengan saline 1+1 hasil kali 2.

Data ini dapat dilihat pada laporan verivikasi via :

www.human.de/data/gb/vr/SU-LDLDD.pdf atau

www.human-de.com/data/gb/vr/SU-LDLDD.pdf

Nilai rujukan

Laki-laki Wanita

resiko menurun untuk CHD < style=""> < style="">

resiko meningkat untuk CHD > 172 mg/dl > 167 mg/dl

Range ini diberikan hanya sebagai orientasi, tiap laboratorium harus membuat range rujukan sendiri, Sex, diet, umur, lokasi geografi dan faktor lain mempengaruhi nilai yang diharapkan.

Kontrol kualitas

Semua serum manusia berdasarkan serum kontrol dengan kadar LDL-cholesterol yang diukur dengan metoda ini dapat dipakai.

Otomasi

Aplikasi untuk alat tertentu tersedia sesuai dengan permintaan.

Referensi

1. Okada. M. et al., J. Lab. Clin. Med. 132, 195 - 201 (1998)

_2. In-house data

_3. ISO 15223 Medical devices – Symbols to be used with medical device labels, labeling and information to be supplied.